Kind: captions
Language: id
Hai
assalamualaikum warahmatullahi
wabarakatuh pada video kali ini Mari
kita bahas bagaimana tahapan dasar dari
rekayasa genetika namun sebelum kita
membahas sahabatnya tersebut tentunya
kita harus memahami apa yang dimaksud
dengan rekayasa genetika secara
sederhana rekayasa genetika dapat kita
Artikan sebagai proses pengubahan
susunan materi genetik suatu organisme
Sehingga dalam artian lain kita dapat
mengatakan rekayasa genetika adalah
pemodifikasian materi genetik suatu
makhluk hidup ada berbagai macam
rekayasa genetika misalkan saja
pengubahan satubasa materi genetik suatu
Organisme
ada juga dengan cara penghapusan daerah
tertentu dari materi genetik suatu
organisme
dan contoh lain dari rekayasa genetika
yang paling umum kita temukan adalah
penambahan Z dari satu spesies ke
spesies sehingga spesies lain ini
mendapatkan game
Hai nah pada video kali ini kita akan
menekankan prosedur atau tahapan dasar
Bagaimana caranya kita menyisipkan gen
tertentu dari suatu spesies bakteri
dalam tahapan itu ada 4
yang pertama adalah kita melakukan
isolasi fragmen DNA yang kita inginkan
fragmen DNA ini adalah fragmen DNA yang
ingin kita sisipkan ke bakteri
ini bisa kita peroleh dari manusia atau
dari tumbuhan atau misalkan kita ingin
mengisolasi gen insulin kemudian gen
insulin tersebut kita ingin sisipkan ke
bakteri sehingga langkah awalnya adalah
kita isolasi
Nah setelah gen insulin atau
fragmen-fragmen
DNA tersebut kita insersi kita masukkan
kita sisipkan ke vektor-vektor adalah
pembawa Nah setelah Factor tersisipi DNA
Neng kita inginkan selanjutnya adalah
kita melakukan transformasi pada bakteri
sehingga bakteri mengalami transformasi
alias mendapatkan Factor yang membawa
fragmen DNA yang tadi kita inginkan
bakterinya kemasukan fragmen DNA asing
yang sudah dibawa oleh
dan tahapan terakhir adalah skrining
atau menyeleksi menentukan bakteri mana
yang berhasil mengalami transformasi
alias mengambil Factor yang telah
Tersisih oleh DNA asing yang kita
inginkan tadi
hingga tahapan terakhir disini saya
Tuliskan adalah skrining bakteri
rekombinan Sekarang mari kita bahas
secara mendetail Empat tahapan utama
yang pertama adalah isolasi fragmen gen
misalkan tadi ya kita ingin menyisipkan
gen insulin maka fragmen DNA kita adalah
gen insulin gen insulin kita ambil dari
sel pankreas manusia nabi
Gimana caranya kita mendapatkan potongan
gen tersebut maka kita tentunya perlu
memotong DNA dari sel pankreas sehingga
kita mendapatkan fragmen DNA yang
membawa gen insulin
Bagaimana cara memotongnya dengan
bantuan enzim
kelompok enzim yang bisa memotong DNA
tadi kita kenal sebagai kelompok enzim
endonuklease restriksi
ada berbagai macam Indonesia restriksi
dan salah satu enzim endonuklease
restriksi yang paling terkenal adalah
Eko Edward
Nah di sini bisa kita lihat ya namanya
Eko Erwan Kenapa kok namanya Eko Irwan
penamaan ini didasarkan dari nama
spesies bakteri dimana enzim tersebut
diperoleh Eko itu
ya jadinya enzim ini diperoleh dari
Hai nah kemudian kita lihat di sini
digambarkan enzimnya dalam bentuk
gunting ini hanya skema ya jadinya enzim
tersebut bisa nempel gitu enaknya
kemudian
akibatnya hasil potongannya seperti nah
bentukan lincip seperti ini dikenal
sebagai
referensi lain dikenal sebagai
enzim
dan seperti dan yang perlu kalian
ketahui
materi di dalam sel bakteri itu banyak
sekali berbagai macam enzim endonuklease
restriksi
dan tadi yang saya sampaikan enzim ini
fungsinya adalah memotong DNA yang jadi
pertanyaan bakteri mengandung banyak
enzim
tetapi tidak terpotong-potong di dalam
selnya banyak rezeki jawabannya adalah
secara alami memang di battery
mengandung banyak enzim tersebut Namun
DNA dari bakteri itu terlindungi dari
enzim endonuklease restriksi
terlindunginya Kenapa karena ternyata
DNA dari bakteri itu mengalami metilasi
tertempel gugus metil nah ketika DNA
tertempel gugus metil dia akan
terlindungi dari Aktivitas enzim
endonuklease restriksi sehingga bakteri
mengandung berbagai macam enzim dalam
namun materi genetiknya terlindungi dari
aktivitas pemotongan oleh enzim
tadi saya singgung ya bahwasanya
dapat menghasilkan ujung Lancip atau
kohesif n atau istilah lainnya di sini
bisa kita lihat contoh-contoh enzim
endonuklease restriksi yang lain
jadi ini yaitu hewan hasilnya seperti
ini kemudian dijahit
kemudian di sini ada bangku kemudian
uang kemudian Ada Taqwa tadi saya
singgung bahwasanya penambahan enzim ini
didasarkan pada spesies bakteri dimana
enzim tersebut
berasal dari escherichia colli
Kemudian Kemudian gintre hanya itu
hemofilus in-nya itu influenza Bang Hai
b nya tuh basilus amnya tuh dari
amyloliquefaciens dan seterusnya di sini
bisa kita lihat berbagai enzim Ini
sama-sama menghasilkan ujung Lancip atau
Tiki atau
Ada pula enzim-enzim yang menghasilkan
pemotongan tumpeng sebagai
ujung tumpul disini contohnya adalah
enzim itu
sobat terlalu itu dari kata khusus
jadinya enzim ini berasal dari bakteri
kemudian enzim Hai tiga berasal dari
spesies hemofilus eigrp tikus dan
seterusnya ketiga enzim contoh ini
pemotongannya sejajar sehingga ujung
hasil pemotongan tumpul di sini bisa
kita lihat ada kelompok enzim restriksi
yang menghasilkan ujung langsung ada
kelompok enzim restriksi yang
menghasilkan untung yang menjadi
pertanyaan adalah peneliti lebih suka
Mana lebih suka menggunakan enzim yang
menghasilkan ujung Lancip atau tumpul
ternyata jawabannya adalah peneliti
lebih suka yang ujung bisa karena dengan
melakukan pemotongan menggunakan rezeki
yang menghasilkan ujung Lancip
perekayasaan genetika itu menjadi lebih
presisi lebih cepat lebih akurat
pemotongan kemudian dilanjutkan dengan
penempelan
DNA itu menjadi lebih cepat maksudnya
gimana Kenapa sih ini kita potong
kembali lagi negara tujuan awalnya
adalah kita tadi mau mengisolasi tak
pede Nah kita ingin mengisolasi fragmen
DNA a maka DNA
materi genetiknya apapun urutan basanya
apapun prakteknya bisa nempel di sini
berbeda dengan ujung Lancip di sini unik
sehingga yang nanti yang ngisi di sini
itu merupakan fragmen DNA yang
diinginkan begitu gitu ya Oleh karena
itu peneliti lebih suka
atau ujung nanti oke itu langkah pertama
yaitu isolasi fragmen DNA yang kita
inginkan Langkah kedua prosedur kedua
adalah kita insersi menyisipkan fragmen
DNA tersebut
vektor-vektor itu ada bermacam-macam ada
dan sebagainya Nah contoh yang paling
umum digunakan oleh peneliti ketika
melakukan rekayasa genetika Factor yang
digunakan adalah Ini contohnya ya
plasmid puc19
bila kita ingat pelajaran materi genetik
itu adalah DNA sirkuler diluar kromosom
yang mampu mereplikasi sendiri sirkuler
itu ini dia di luar kromosom utama
kemudian Kenapa kok dia bisa replikasi
sendiri karena dia punya daerah ori
origin of repetition karena dia punya
daerah ori dia bisa melakukan replikasi
menggandakan materi genetiknya sendiri
begitu selain memiliki ori plasmid juga
memiliki gen-gen tertentu disini adalah
Z di sini ada AMP begitu
fungsinya sebagai vektor-vektor membawa
membawa gen atau DNA asing yang kita
ingin sisip kita ingin masukkan ke
spesies target Ok sekarang coba kita
bayangkan
kita punya
kemudian
potong menggunakan enzim restriksi
tertentu misalkan Eko Erwan makan nanti
hasilnya seperti ini
kemudian disini akan mengangkat nah
disini anggap aja ngakunya
vektor-vektor nya kan melingkar
melingkar besar namun ini hanya bagian
kecilnya nah factory ini kita ingin
sisipkan gender tentu maka untuk
menyisipkan gen tertentu ke factory Ini
dipotong dahulu
enzim restriksi
maka akan terbentuk ujung
nah kemudian kita bisa menyiapkan gen
tertentu yang ingin kita sisipkan nah
gen tertentu tersebut juga dipotong
sehingga
ujung-ujungnya sama nah ini contohnya
sehingga
dengan sempurna
Ini Salah satu alasan yang
lebih suka enzim enzim restriksi yang
menghasilkan ujung
ini gambarannya misalkan itu sirkuler ya
jadinya nanti dia bisa nyicip disini
atau lebih jelasnya seperti ini Hai
misalkan ini ada plasmid batunya
sirkuler kemudian kita punya DNA panjang
kemudian daerah sini ingin merupakan
daerah yang membawa gen yang kita
inginkan maka baik plasmid maupun
praktek Adena ini kita potong
menggunakan enzim restriksi yang sama
sehingga nanti bentuk atau pola
potongannya sama kemudian di sini nanti
menghasilkan fragmen DNA disini
vektornya Sudah terpotong ketika
dicampur maka fragmen DNA tersebut bisa
nyicip ke vektor tersebut
nanti sesama bahasa yang komplementer
akan membentuk ikatan hidrogen
kemudian nanti di ujung sini ah nanti
akan ditempel oleh ligase sehingga
bentuknya sempurna seperti itu
tahapan kedua dari rekayasa genetika
fragmen DNA vektor tahapan ketiga adalah
kita melakukan transformasi bakteri
jadinya kita harapkan
Factor yang sudah Tersisih oleh dinas
ini bisa masuk ke Hai bakterinya
mengalami transformasi
Apa tujuannya agar DNA asing yang kita
inginkan tadi masuk
tersebut ini tahapan ketiga yang jadi
permasalahan adalah yang pertama tidak
semua bakteri nanti bisa kemasukan
plasmid ini
permasalahan pertama jadinya misalkan
kita menyiapkan 100 bakteri kita juga
menyiapkan 100 plasmid ketika kita
campur belum tentu semua bakteri
tersebut kesisipan atau kemasukan resmi
tersebut artinya bakteri tersebut belum
tentu mengalami transformasi
permasalahan pertama permasalahan kedua
tidak semua Factor bisa dengan berhasil
yang kita inginkan
misalkan kita menyampulkan
100 vektor dengan 100 fragmen DNA
100 factory itu sudah dipotong oleh
Irwan misalkan Hai dan 100 DNA asing ini
juga merupakan hasil pemotongan itu
Herman ketika kita campur belum Tuh
semua Factor tersebut insersi oleh DNA
asing
di sini jadinya menimbulkan permasalahan
juga
nah sekarang yang menjadi PR peneliti
adalah bagaimana caranya
memastikan bakteri yang telah mereka
siapkan tadi tersisipi oleh Factor
tersebut sudah membawa
maka di tahapan terakhir dari Rekayasa
tidak perlu adanya skrining bakteri
rekombinan yang Tujuannya adalah untuk
menentukan obat berhasil mengambil
Factor yang
ada dua permasalahan yang pertama tidak
semua DNA bakteri mengalami transformasi
yang kedua tidak semua Factor
karena ada dua masalah ini maka
sekelilingnya juga ada Hai seleksi nya
secara umum yang pertama adalah
bagaimana caranya kita memastikan
bakteri tersebut sudah kemasukan feat
tadi sudah tersinggung di bagian ada
awal contoh vektor adalah plasmid dan
plasmid itu membawa gadget
Nah itu juga ada gen-gen yang mampu
menyebabkan suatu bakteri resisten
terhadap antibiotik misalkan
jadinya nama gamenya mbr
misalkan ya
factory Ini mengandung MPR sehingga
ketika factory ini masuk ke
sehingga ketika dikasih antibiotik dia
tetap
ini seleksi pertama
jadinya ketika kita mencampurkan vektor
dengan bagaimana caranya kita menentukan
obat sudah berhasil mengambil vektor
akhir-akhir ini belum mengasah belum
mendapatkan Factor tadi caranya adalah
kita tambahkan antibiotik Ambisi the nah
sel-sel bakteri yang mati Merupakan
bakteri yang gagal mengalami
transformasi sedangkan sel-sel bakteri
yang berhasil tubuh menjadi koloni
merupakan sel-sel bakteri yang berhasil
mengambil Factor tadi begitu
kemudian permasalahan kedua adalah
berkaitan dengan belum Factor yang masuk
adalah Factor yang membawa gen yang kita
inginkan
nah bagaimana caranya kita
nah jadinya peneliti itu kita peneliti
mendesain
bahwasanya geunyang kita
nanti akan
keget tertentu misalkan
misalkan jadinya factory ini memiliki am
Hai misalkan saja daerah sini ada Jane
lage lagu Zedd itu game yang bisa
menghasilkan enzim yang namanya peta
adalah
fungsinya adalah memecah laktosa
disakarida menjadi dua monosakarida
yaitu glukosa dan laktosa
nah disini disini saya katakan misalkan
ya daerah sini ada kemudian peneliti
[Musik]
nanti DNA asing ini akan di
tengah-tengah laut Ketika suatu gen
tersisipi oleh fragmen DNA tersebut akan
rusak yang tersebut tidak bisa
menghasilkan produk yang fungsional sama
ketika
z-z-z-z tidak bisa menghasilkan
sehingga
tidak ada enzim yang bisa membaca
kembali lagi
misalkan saja ini vektor a ekornya tidak
tercipta dinas kemudian factory ini akan
masuk ke bakteri ini misalkan ketika
dites oleh ampisilin Oh dia hidup
artinya bakteri tersebut bisa mengambil
rekor namun disimpulkan bakteri tersebut
mengambil Factor yang belum tersisip
lembaga peneliti tersebut bisa
menyimpulkan seperti itu peneliti
tersebut bisa menyimpulkan seperti itu
ketika nanti dia mengecek apakah laktosa
yang medium itu dipecah menjadi
monosakarida
jadi medium Ya selain mengandung
ampisilin mengandung laktosa
artinya bakteri tersebut
mengambil Factor yang belum tersisipi
oleh dinas
nah kondisi yang lain adalah ada Factor
kemudian glazed nya sudah
kemudian Factory akan masuk bakteri
tersebut dampaknya bakteri tersebut
lanjutnya nggak bisa menghasilkan produk
fungsional
sehingga dia tidak bisa menghasilkan
enzim yang bisa memecah laktosa dan
ketika dicek di medium Oh koloni bakteri
ini tidak bisa memecah laktosa sehingga
kita simpulkan bakteri ini membawa
Factor yang vektornya sudah tersisipi
oleh DNA asing yang kita inginkan
gitu ya itu dua tahapan seleksi
Oke untuk menyimpulkan atau perang
kita bisa melihat ini merupakan skema
rekayasa genetika pada
langkah pertama tadi kita mengisolasi
DNA asing yang kita inginkan misalkan
ini ini misalkan sel manusia
manusia kemudian ini inti selnya
kemudian didalamnya ada kromosom
kemudian kita tentukan kromosom manusia
Saya ingin mengambil gen agen insulin
misalkan Bagaimana caranya kita
mengisolasi gen insulin tersebut kita
potong tersebut menggunakan
sehingga menghasilkan fragmen seperti
ini kemudian
kita juga menyiapkan vektor-vektor nya
disini plasmid ya Nah kemudian di sini
ada di planet Ini mengandung MPR ya
Ambisi dan resisten dia juga mengandung
lagu Zedd Jin yang fungsinya
menghasilkan beda kalau qasidah dan dia
juga punya ori Nah di sini Kita sudah
punya fragmen DNA yang dipotong
menggunakan enzim restriksi tertentu
maka vektor yang kita gunakan juga kita
potong menggunakan enzim restriksi yang
sama Setelah itu kita masuk ke tahapan
kedua
tahapan kedua adalah pengintegrasian gen
asing ke masjid tersebut
keduanya cara pengisiannya gimana kita
potong yang sama Gimana cara kita
mengisolasi gen asing tadi kemudian
nanti kita campur sehingga nanti
sebagian Factor akan berhasil insersi
oleh DNA asing tersebut Ini hasilnya
Factor rekombinan tombol kemudian
tahapan selanjutnya adalah kita masih
bakteri target
transformasinya ada berbagai cara ya
kita tidak menggunakan listrik bisa
menggunakan cairan kimia tertentu yang
harapannya adalah factory ini akan masuk
kedalam sel bakteri tersebut
nah tahapan terakhir adalah kita
melakukan scanning atau seleksi
bakteri-bakteri mana sih yang berhasil
mengalami transformasi dan bakteri
Bagaimana yang merasa mengambil Factor
yang sudah terisi oleh
jadinya tidak hanya transformasi saja
tidak hanya bakteri yang kemasukan
Factor saja tapi kita pastikan juga
Factor yang masuk itu merupakan Factor
yang sudah Tersisih oleh DNA asing tadi
tadi G2 seleksi yang pertama berdasarkan
resistensi terhadap antibiotik maka di
medium ini kita tambahkan ampisilin
misalkan ketika tidak terbentuk koloni
atau bakterinya mati maka artinya
bakteri tersebut belum mengalami
transformasi Kenapa karena dia belum
mengambil kelas hit belum berhasil
memasukkan plasmid kedalam tubuhnya di
mana plastiknya mengandung MPR kalau dia
tidak berhasil mengambil plasmid ini
maka bakteri ini enggak punya mbr
sehingga ketika dikasih Ambisi dia mati
begitu kemudian seleksi kedua kita
pastikan bakteri rekombinan tadi adalah
bakteri yang membawa Factor yang sudah
Tersisih oleh gen insulin
caranya gimana kita cek IMEI jump sudah
kita kasih laktosa dan maltosa tersebut
tidak dipecah menjadi
kita belajar bikin kita bisa menentukan
reaksi kimia dengan perubahan warna
edisi Nia salah satu prosedurnya adalah
kalau masih adalah kosa warna media itu
biru namun ketika laktosa tersebut
dipecah menjadi monosakarida
maka media menjadi putih Nanti kita cek
koloni ini warnanya biru maka tersebut
dipastikan mengambil Factor yang belum
gen insulin namun ada koloni-koloni nya
kemudian menyebabkan media disekitarnya
warna putih maka koloni bakteri tersebut
merupakan kumpulan bakteri yang berasal
dari bakteri yang berhasil mengambil
Factor yang sudah terisi oleh
karena tidak dipecah menjadi
monosakarida
tidak berhasil karena gen-z dari
tersebut sudah tidak fungsional akibat
tersebut sudah terisi oleh langsung tadi
sehingga kita bisa seleksi kita bisa
pilih uh koloni-koloni inilah yang bisa
menyelam sudah membawa Factor yang
Factor itu sudah tersisipi oleh Canyon
kita
karena sudah dapat koloni yang kita
inginkan koloni tersebut bisa kita
kultur bisa kita perbanyak kemudian kita
ambil DNA plasmid DNA yang mengandung
gen insulin
Oke demikian penjelasan saya terkait
bagaimana tahapan atau prosedur dasar
Terima kasih assalamualaikum
warahmatullahi wabarakatuh